众所周知,很多疾病都具有一定的传染性,支原体感染就是这样一种常见疾病,支原体感染怎么治疗也成了很多人关心的问题。专家介绍,现在这种疾病的发病率与日俱增,对患者的身心健康损害很大,患者需要及时进行诊治,以下就是支原体感染诊断方法的介绍。
1、采集标本
一般为泌尿生殖试子或刷片,少数取前列腺液,精液、关节液,或取输卵管,直肠活检物,近年来用初段尿标本离心物,以取代尿道拭子。拭子取材时,将拭子插入男性尿道2~4cm,用力擦取。该方法容易造成尿道损伤及继发感染。用时须慎重。女性则需先清洁宫颈鳞状与柱状上皮结合部,用细胞刷收集宫颈标本,能增加感染细胞的数量,较棉拭子敏感性高。
2、PCR扩增
传统的方法为的反应体积为100μl,含5x反应缓冲液20μl和FD~DNA聚合酶2μ、4种dNTP各200μmol/L以及引物对各25pmol/L。上述成分预先一次性分装于0。5ml离心管,~20℃备用。临用加模板DNA2μl,短暂离心,加100μl矿物油覆盖。现在试剂已商品化,反应体积为25μl,单管已分装好,只要加入模板DNA即可。置DNA扩增仪进行40次循环扩增。每次循环包括90℃变性45s第一次循环变性2min,55℃退火30s和72℃延伸40s最后一次循环72℃,延伸5min三个步骤。每次扩增均应作阴阳性对照。
3、扩增产物的检测
5%琼脂糖凝胶电泳检测:取10ulPCR扩增物作1。5%琼脂糖凝胶电泳、0。5μg/ml溴化乙锭染色,以PGEM~3Zf+DNA~HaeⅢ为分子量标准,置紫外透射仪观察结果。
支原体感染检查
1、血常规:周围血白细胞计数一般正常,嗜酸性粒细胞增多。
2、x线检查:衣原体肺炎胸片无特异性,多为单侧下叶浸润,表现为节段性肺炎,严重者呈广泛双侧肺炎。沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润,过度充气征比较常见,偶见大叶实变。
3、直接涂片镜检:取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位标本做涂片,进行GZmesa染色,原体染成红色,始体染成深蓝色。沙眼衣原体包涵体因含有糖原。801染色染成褐色。
4、快速抗原检测:多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体,还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体、酶标抗体18G及底物进行比色定量检测。这两种方法简便敏感。
患者对所有疾病都必须有一个良好的防治意识,在检查诊断可以采集标本,扩增产物的检测,x线检查,快速抗原检测等等。疾病来临前做好相关防治工作,争取防患于未然,当然,如果疾病已经发生,患者一定要想方设法缓解症状,配合医生的检查和治疗,尽早远离支原体感染。
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